PROPRIETA’ IMMUNOSTIMOLANTI DI PROTECTM IN TROTA IRIDEA (ONCORHYNCHUS MYKISS)

L’utilizzo di alimenti funzionali consente di migliorare lo stato di salute dei pesci allevati, incrementare le performance di crescita, salvaguardare la morfologia del tratto gastrointestinale e l’equilibrio della microflora intestinale, aumentare la resistenza alle malattie infettive (Newaj-Fyzu & Austin, 2015). Questo studio è stato finalizzato ad indagare in vitrogli effetti immunostimolanti del prodotto commerciale ProtecTM(Skretting, Mozzecane VR) sull’attività di “burst respiratorio” e sulla proliferazione dei leucociti di trota iridea (Oncorhynchus mykiss). Lo studio è preliminare ad una prova in vivoattualmente in corso finalizzata a valutare l’effetto di ProtecTMsulla risposta immunitaria della trota.L’attività di “burst respiratorio” dei leucociti purificati da rene anteriore di trota (60-100 g, n=6) incubati in micropiastra per 90 minuti con ProtecTM(tal quale o sonicato) LPS, zymosan (160 μg/ml) e PMA (2.5 μg/ml, controllo positivo) è stata misurata mediante chemiluminescenza con luminolo. La proliferazione dei leucociti (n=6) incubati per 72 ore con ProtecTM(tal quale o sonicato), LPS, zymosan (160 μg/ml e 20 μg/ml) e PHA (20 μg/ml, controllo positivo) è stata valutata mediante metodo colorimetrico con MTT (Bulfon et al., 2016). La prova in vivo, condotta presso una troticoltura intensiva del Friuli Venezia Giulia, contempla un gruppo di trote di controllo (peso medio iniziale 5 g) alimentato con mangime commerciale (Optiline HE, Skretting, Mozzecane VR) e un gruppo di trote alimentato per 10 settimane con ProtecTM. Il razionamento verrà adattato progressivamente alla crescita dei pesci, secondo quanto indicato dalla ditta mangimistica. Al termine del trial, le trote verranno sottoposte a prelievo di sangue e rene anteriore previa anestesia con MS222 (100 mg/l), per la valutazione dell’attività del lisozima nel siero e dell’attività di “burst respiratorio” dei leucociti (Bulfon et al., 2016).I risultati ottenuti in vitrodimostrano che ProtecTMè in grado di stimolare significativamente l’attività di “burst respiratorio” e la proliferazione dei leucociti di trota iridea (P≤0,05). Specificatamente, ProtecTMsonicato induce una risposta di “burst respiratorio” paragonabile a quella prodotta dagli stimoli LPS e zymosan, mentre ProtecTMnon trattato induce una risposta molto maggiore e paragonabile a quella determinata dalla stimolazione delle cellule con PMA usato come controllo positivo. Dall’altro lato, la proliferazione dei leucociti stimolati con ProtecTMsonicato (20 μg/ml) è risultata significativamente maggiore rispetto a quella delle cellule di controllo e delle cellule stimolate con zymosan, paragonabile a quella delle cellule stimolate con PHA e LPS. Gli effetti della somministrazione di ProtecTMsulla risposta immunitaria della trota iridea verranno discussi.